硝基呋喃類藥物是一種抗生素，對大多數革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌等病原體均有殺滅作用。硝基呋喃類藥物因為價格較低且效果好，被廣泛應用于畜禽及水產養殖業，以治療由大腸桿菌或沙門氏菌所引起的腸炎、疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等。由于硝基呋喃類藥物及其代謝物對人體有致癌、致畸胎的副作用，中華人民共和國農業部將硝基呋喃類藥物列為在飼養過程中禁止使用的藥物，在動物性食品中不得檢出。硝基呋喃類原型藥在生物體內代謝迅速，其代謝產物分別為AOZ、AMOZ、AHD、SEM，和蛋白質結合而相當穩定，故常利用代謝物的檢測來反應硝基呋喃類藥物的殘留狀況。
本試劑盒是應用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品，與儀器分析技術相比具有快速、簡便、靈敏度高等優點，能減少工作強度。
1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。切勿冷凍。
3、洗滌液【配液1】在使用前也需回溫。
4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本：加標準品或樣本50μL/孔到對應的微孔中，再加入呋喃唑酮代謝物酶標物50μL/孔，然后再加入呋喃唑酮代謝物抗試劑50μL/孔輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環境中反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液【配液1】250μL/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于25℃避光環境中反應15min。
8、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內讀完數據），測定每孔OD值(若無酶標儀，則不加終止液用目測法可進行判定)。
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